多发性内分泌腺瘤RET基因突变检测

2016-10-18 编辑:admin
项目介绍
RET原癌基因:位于10号常染色体长臂(10q11.2),全长60kb,包含21个外显子,编码1100个氨基酸的酪氨酸激酶受体超家族RET蛋白,其突变与多种疾病的发生密切相关,包括多发性内分泌腺瘤病2型(multiple endocrine neoplasiatypeⅡ,MEN2)、甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinomas,PTC)、先天性巨结肠及肺腺癌等,其不同的突变类型可导致肿瘤侵袭能力的不同。随着对RET基因突变研究的深入,RET有望成为多种肿瘤选择性治疗的靶点.
1、MEN2(多发性内分泌腺瘤病2型):MEN2主要由原癌基因RET突变所致,又分为MEN2A和MEN2B。几乎所有MEN2患者伴有RET原癌基因的突变,最常见的是错义突变,常累及受体蛋白细胞外的富含半胱氨酸的二聚体结构域(8~13号外显子)和细胞内的TK催化位点(15、16号外显子)。
MEN2A主要发生8~14号外显子突变;MEN2A型又称Sipple综合征,其分子病理特点是绝大多数MEN2A由RET原癌基因突变导致细胞外区域半胱氨酸残基改变,最常见的为第11号外显子的634密码子突变,半胱氨酸被替换成精氨酸(C634R);还有第10外显子609,611,618,620密码子等的突变。
MEN2B主要发生15、16号外显子突变。MEN2B型发病率低但病情严重,Machens等报道MEN2B患者中甲状腺髓样癌平均发病年龄为10岁,明显早于MEN2A型患者。其分子病理特点是第16号外显子的918密码子突变率高达95%,其他如第15号外显子883密码子突变以及少数患者具有RET双点突变,如V804M及E805K双点突变。
2、甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)在临床上分为遗传型髓样癌和散发型髓样癌。RET原癌基因的突变是MTC发生的主要分子病因学基础,约95%的遗传型MTC和80%以上的散发型MTC存在RET基因突变。遗传型MTC患者634密码子突变最常见,突变类型主要为C634Y,此外还存在609,618,620等密码子的突变。散发型MTC患者中M918T突变最常见,但突变频率在不同人群中存在差异。MTC的侵袭性与RET突变类型相关,其侵袭性风险程度可分为4级:
1)A级突变侵袭性最低,系RET基因768,790,791,804及891密码子突变,特别是携带密码子804突变   的患者可能在很大年龄才发病;
2)B级突变侵袭性较低,包括609,611,618,620及630等密码子突变;
3)C级突变侵袭性相对高,包括634密码子的某些突变类型;
4)D级突变侵袭性最高,包括883,918等密码子突变和某些双点突变类型,它们与发病年龄低、高转移   率、高复发率及高病死率相关。
3、嗜铬细胞瘤/副神经节瘤(PHEO):在MEN-2A发病率为50%-80%。多见于青少年,70%-75%累及双侧肾上腺,极少累及肾上腺以外,几乎均属良性,恶性者仅约3%-4%。始为双侧肾上腺髓质弥漫性或结节性增生,是PHEO的前驱病变>25px的结节可诊断为PHEO。部分患者伴节细胞神经癌或神经母细胞瘤的成分,即所谓混合性嗜铬细胞瘤。PHEO可分为遗传型和散发型两种,它的发生与多种遗传基因的异常相关,包括RET,VHL,SDHx和NF1的基因突变。研究表明RET基因突变类型与MEN2临床表型之间显著相关,其中突变频率最高的是634和918密码子,携带634、918密码子突变的患者有50%合并嗜铬细胞瘤,而携带10号外显子突变,如609,611,618,620密码子突变患者却罕见合并嗜铬细胞瘤。
样本要求
蜡块,石蜡切片,石蜡碎片(石蜡卷),新鲜组织四者任选一项,石蜡包埋时间为半年内,且组织切片中肿瘤细胞占比应大于50%。蜡块标本中包含的组织量不少于10 mm3,即组织总体积不少于米粒大小。标本要求切片厚度为5-10 μm(不能小于5 μm),每片面积在250 mm2,数量不少于8片(若每片面积不能达到要求,则增加送检切片数量,使总组织量在20 mm2以上)。新鲜组织要求:取出后立即浸泡在95%酒精中,组织量不少于20 mm3,即组织总体积不少于米粒大小。
参考值
突变/未突变 测序
临床意义
基因诊断RET于1993年被鉴定为MEN-2(多发性内分泌腺瘤病2型)易感基因,基因携带者外显率几乎100%,家系RET突变分析可在临床症状出现前甚至产前检出致病基因携带者,超早期诊断MEN-2。RET基因检测已成为诊断MEN-2的金标准。推荐用于所有伴MTC(甲状腺髓样癌)或PHEO(嗜铬细胞瘤)的患者,而不必考虑其年龄、是否并发其他内分泌肿瘤、是否有家族史。美国临床肿瘤学会(ASCO)也推荐基因诊断作为MEN-2的标准检测指标。依据罹患侵袭性MTC的风险将RET突变分为3个危险等级:
1级(低危):FMTC/(10号外显子的609,13号外显子的768、790、791,l4号外显子的804,15号外显子的 
891);
2级(中危):MEN-2A/(10号外显子的611、618、620,第11号外显子的634);
3级(高危):MEN-2B/(15号外显子的883,第16号外显子的918)。
具有遗传性RET突变的患者,无论血清降钙素水平如何,均需性全甲状腺切除术。国际RET突变协会阐明患者基因型与遗传MTC的临床侵袭性有关,并且制定了预防性甲状腺切除术的时间表:
患有MEN2B和RET第883或918外显子突变者为高危患者,指南要求在1岁内手术。
RET第611、618、620和634外显子突变的MEN2A或FMTC患者要求在5岁内完成手术。
  其他突变应个体化处理,但手术治疗也应于童年时期完成。
  RET突变基因携带的MEN-2患者的一级亲属应行RET基因筛查。

本网站所有注明“来源:医诺医学”的文字、图片及音视频资料,版权均归医诺医学所有,其他平台转载需得到授权且注明:“来源:一诺医学”。本站所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和/或作者,不希望被转载的媒体和/或个人请与我们联系(0571-86635366),我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点,不代表本站立场。

热门检测